Molecular diagnosis of amoebiasis

Bol Med Hosp Infant Mex. 2022;79(1):3-16. doi: 10.24875/BMHIM.21000044.

Abstract

Amoebiasis is an intestinal parasitosis caused by the protozoan Entamoeba histolytica that represents the third leading cause of mortality due to parasitosis. It is a prevalent disease in tropical climate regions with poor or absent sanitary services. Microscopy and antigen detection techniques are routinely used to diagnose amoebiasis because of their low cost and ease of application. However, these techniques do not differentiate E. histolytica infections and other potentially pathogenic species such as Entamoeba moshkovskii or Entamoeba bangladeshi. Therefore, in the last decades, molecular tests that allow correct identification of the causal agent of amoebiasis and the establishment of the prevalence of the infecting species have been developed. Techniques based on nucleic acids, such as conventional, multiplex, or real-time polymerase chain reaction (PCR), are being seriously considered in clinical laboratories, because they detect the etiologic agent directly from the sample without the need for previous prolonged culture, thus reducing diagnostic time. Also, the nested PCR test and the sequencing of ribosomal markers have allowed the identification of new parasitic species in humans, such as E. moshkovskii and E. bangladeshi, and an improved characterization of the known infecting species. The application of multiplex platforms allows the simultaneous identification of infecting species, increasing the sensitivity and specificity of these techniques. Therefore, the molecular diagnosis of amoebiasis is projected as an innovative tool in the fight against this parasitosis.

La amebiasis es una parasitosis intestinal causada por el protozoario Entamoeba histolytica y representa la tercera causa de mortalidad por parasitosis. Es una enfermedad prevalente en regiones de clima tropical con deficientes o nulos servicios sanitarios. Las técnicas de microscopía y detección de antígenos se emplean sistemáticamente para el diagnóstico de la amebiasis por su bajo costo y fácil aplicación. Sin embargo, no permiten diferenciar entre infecciones por E. histolytica y otras especies de potencial patogenicidad como Entamoeba moshkovskii o Entamoeba bangladeshi. Ante ello, en las últimas décadas se han desarrollado pruebas moleculares que permiten una correcta identificación del agente causal de la amebiasis y el establecimiento de la prevalencia de la especie infectante. Las técnicas basadas en ácidos nucleicos, como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) convencional, múltiple o en tiempo real, están siendo seriamente consideradas en los laboratorios clínicos, porque detectan al agente etiológico de manera directa en la muestra sin necesidad de cultivo prolongado previo, disminuyendo de esta forma el tiempo del diagnóstico. Asimismo, la PCR anidada sumada a la secuenciación de marcadores ribosomales ha permitido la identificación de nuevas especies parasitarias, como E. moshkovskii y E. bangladeshi en humanos, y una mejor caracterización de las especies infectantes ya conocidas. La aplicación de las plataformas multiplex permite la identificación simultánea de especies infectantes, aumentando la sensibilidad y la especificidad de estas técnicas. Por esto, el diagnóstico molecular de la amebiasis se proyecta como una verdadera herramienta innovadora en la lucha contra las parasitosis.

Keywords: Amebiasis; Amoebiasis; Biología molecular; Diagnostic; Diagnóstico; Entamoeba spp; Molecular biology; PCR.

MeSH terms

  • Amebiasis*
  • Entamoeba histolytica* / genetics
  • Entamoeba*
  • Entamoebiasis* / diagnosis
  • Entamoebiasis* / epidemiology
  • Entamoebiasis* / parasitology
  • Feces / parasitology
  • Humans